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本文轉(zhuǎn)載自微信公眾號(hào)：科學(xué)網(wǎng)（ID：sciencenet-cas）

時(shí)隔3年，曾處于輿論旋渦的韓春雨公開了一項(xiàng)最新研究成果。

近日，韓春雨在預(yù)印本網(wǎng)站BioRxiv上發(fā)表了一篇關(guān)于基因編輯的新文章：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。

biorxiv網(wǎng)站的該論文截圖

文章共有5名作者，依次為Feng Gao, Yue Sun, Feng Jiang, Xiaoyue Bai, Chunyu Han，工作單位均為河北科技大學(xué)基因編輯研究中心。其中，韓春雨為通訊作者。

文章摘要和內(nèi)容顯示，RNA具有重要且多樣的功能，將活細(xì)胞中分離的RNA可視化，將為人們提供關(guān)于其作用的基本信息。迄今為止，科學(xué)家發(fā)明了兩種活體RNA成像系統(tǒng)。

本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，CasE可被設(shè)計(jì)成RNA跟蹤工具。這種工具被稱為“VN-dCasE-VC”，效果和可用性更強(qiáng)。

一位接近韓春雨的人士向《中國(guó)科學(xué)報(bào)》表示：“這篇文章是此前韓春雨工作的延續(xù)，目的都是開發(fā)基因編輯工具。”

通常，首發(fā)在未經(jīng)同行評(píng)議的預(yù)印本上，是為了獲得首發(fā)權(quán)。

“韓春雨下一步還會(huì)投正式期刊的?！鼻笆鋈耸客茰y(cè)。

新聞回顧

2016年5月，《自然—生物技術(shù)》發(fā)表韓春雨團(tuán)隊(duì)新的基因編輯技術(shù)NgAgo，被媒體以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事原型炒作而走紅。

此后半年，韓春雨個(gè)人及其所在大學(xué)陸續(xù)獲得各類名譽(yù)和大量經(jīng)費(fèi)資助。

同時(shí)，亦有國(guó)內(nèi)多名基因編輯領(lǐng)域科學(xué)家實(shí)名發(fā)聲稱實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以重復(fù)，懷疑實(shí)驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。

2017年8月，《自然—生物技術(shù)》發(fā)表題為《是該數(shù)據(jù)說(shuō)話的時(shí)候了》社論，宣布撤回韓春雨團(tuán)隊(duì)于2016年5月2日發(fā)表在該期刊的論文。

2018年9月，河北科技大學(xué)發(fā)布公告，韓春雨團(tuán)隊(duì)不存在主觀造假。但依據(jù)有關(guān)規(guī)定，取消韓春雨所獲得的榮譽(yù)稱號(hào)，終止韓春雨團(tuán)隊(duì)承擔(dān)的科研項(xiàng)目并收回科研經(jīng)費(fèi)。

韓春雨團(tuán)隊(duì)回應(yīng)稱，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)存在缺陷、研究過(guò)程存在著不嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膯?wèn)題。

前述人士告訴《中國(guó)科學(xué)報(bào)》：“這波之后，NgAgo這個(gè)研究方向在中國(guó)做得很慢。韓春雨他們的工作開展起來(lái)也比較困難，連學(xué)生也沒(méi)有新招。”

NgAgo最新研究速覽

2019年2月，美國(guó)加州理工學(xué)院生物工程系教授Alexei Aravin在bioRxiv上發(fā)表論文：Programmable DNA cleavage by Ago nucleases from mesophilic bacteria Clostridium butyricum and Limnothrix rosea。

5月，論文正式發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊《核酸研究》（Nucleic Acids Research）上。

《核酸研究》官網(wǎng)論文截圖

該研究顯示，cbAgo在多種條件下具有很高的活性，可用于在中等溫度下對(duì)單鏈和雙鏈DNA底物進(jìn)行可編程的核內(nèi)裂解。

2019年4月，普渡大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院助理教授Kevin V Solomon在BioRxiv發(fā)表論文：NgAgo-enhanced homologous recombination in E. coli is mediated by DNA endonuclease activity。

Biorxiv網(wǎng)站論文截圖

研究人員對(duì)NgAgo在原核生物中的功能進(jìn)行了表征，發(fā)現(xiàn)其在非嗜鹽性宿主中表達(dá)較差，大多數(shù)蛋白即使在重折疊后也不溶解和不活躍。但是，他們發(fā)現(xiàn)，可溶的部分NgAgo確實(shí)起到了DNA內(nèi)切酶的作用。

研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)，這些內(nèi)切酶活性對(duì)于增強(qiáng)NgAgo引導(dǎo)的大腸桿菌同源重組或基因編輯至關(guān)重要。

在中國(guó)，除了韓春雨，也有一些團(tuán)隊(duì)在開展NgAgo研究。

例如，今年1月，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究團(tuán)隊(duì)在《核酸研究》上發(fā)表論文。

根據(jù)論文摘要，該研究發(fā)現(xiàn)NgAgo以80%~100%的效率增強(qiáng)巴斯德氏菌和大腸桿菌中的基因插入或缺失。研究者分析，NgAgo可能具有作為原核宿主基因編輯器的潛力，但作用機(jī)制不清楚。

根據(jù)《中國(guó)新聞周刊》今年4月報(bào)道，國(guó)內(nèi)六七家在這一領(lǐng)域較有實(shí)力的科研機(jī)構(gòu)此前都對(duì)NgAgo很感興趣。

但在韓春雨論文被熱烈追捧又遭到強(qiáng)烈質(zhì)疑后，這些研究者又逐漸退出，基本不再涉足該研究領(lǐng)域。

需要強(qiáng)調(diào)的是，韓春雨目前發(fā)布的這篇文章只是張貼在了預(yù)印本網(wǎng)站上，尚未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的同行評(píng)議。